Щоб видалити бульбашки повітря під час колонкової хроматографії, важливо переконатися, що колонка упакована та працює належним чином. Ось основні кроки, щоб видалити або уникнути повітряних бульбашок:
Правильна упаковка колонки:
Переконайтеся, що нерухома фаза (наприклад, силікагель або оксид алюмінію) упакована рівномірно та щільно, щоб уникнути повітряних кишень під час початкового налаштування.
Наповніть колонку розчинником, щоб змочити нерухому фазу, запобігаючи появі сухих плям або повітряних проміжків.
Використання розчинника для заповнення колонки:
Перед завантаженням зразка повільно заповніть колонку відповідним розчинником (елюентом), щоб уникнути захоплення бульбашок повітря. Якщо ви помітили бульбашки повітря, дайте розчиннику обережно витекти, щоб виштовхнути їх.
Дайте розчиннику протікати через колонку, поки рівень рідини не перевищить стаціонарну фазу. Це допоможе витіснити повітря, що потрапило в колону.
Дега Розчинник:
Дегазація розчинника перед використанням може допомогти усунути розчинене повітря, яке може утворювати бульбашки під час хроматографії. Це можна зробити за допомогою ультразвукової обробки (за допомогою ультразвукової ванни) або за допомогою вакууму для видалення розчинених газів.
Повільний і постійний потік:
Коли колонку налаштовано та додано розчинник, дозвольте розчиннику текти зі сталою швидкістю, уникаючи високого тиску, який може спричинити захоплення повітря або утворення бульбашок.
Торкніться або обережно потрясіть колонку:
Якщо бульбашки повітря вже потрапили в колонку, обережно постукайте по колонці, щоб випустити повітря. Крім того, ви можете трохи нахилити або покрутити колону, щоб перемістити бульбашки вгору, дозволяючи їм вийти.
Переконайтесь, що під час завантаження не потрапляє повітря:
Завантажуючи зразок на колонку, переконайтеся, що зразок або розчинник не утворюють повітряні кишені. Часто корисно обережно завантажувати зразок за допомогою піпетки, щоб запобігти появі бульбашок повітря.
Виконуючи ці кроки, ви можете звести до мінімуму або видалити бульбашки повітря з колонки та забезпечити плавну ефективну хроматографію.